DIG标记及检测试剂盒 | |||
DIG(地高辛)DNA标记及检测试剂盒 | |||
DIG DNA labeling and Detection Kit | |||
原理:用DIG-dUTP为底物,随机掺入法进行DNA标记,通过酶联免疫杂交的方法检测。该试剂盒可以标记25次反应,每次标记的DNA量为10ug-20ug,并可做50张10×10cm膜的杂交和检测。 应用:非放射性DNA标记及检测试剂盒以检测0.1pg的同源DNA,能检测1ug哺乳动物DNA中的单拷贝基因。跟放射性标记系统比较,此试剂盒能快速得到实验结果,而且消除了放射性同位素的不安全问题。从DNA标记和杂交能见到检测结果,整个实验过程24小时内能完成。这试剂盒的灵敏度与特异性使它适用于所有的杂交技术以替代放射性同位素标记和放射自显影术。这个标记方法和检测系统适用于DNA—印迹转移、菌落杂交、噬斑杂交及原位杂交。 |
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原理:用DIG-dUTP为底物,随机掺入法进行DNA标记,通过酶联免疫杂交的方法检测。该试剂盒可以标记25次反应,每次标记的DNA量为10ug-20ug,并可做50张10×10cm膜的杂交和检测。 应用:非放射性DNA标记及检测试剂盒以检测0.1pg的同源DNA,能检测1ug哺乳动物DNA中的单拷贝基因。跟放射性标记系统比较,此试剂盒能快速得到实验结果,而且消除了放射性同位素的不安全问题。从DNA标记和杂交能见到检测结果,整个实验过程24小时内能完成。这试剂盒的灵敏度与特异性使它适用于所有的杂交技术以替代放射性同位素标记和放射自显影术。这个标记方法和检测系统适用于DNA—印迹转移、菌落杂交、噬斑杂交及原位杂交。 |
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原理:用DIG-dUTP为底物,随机掺入法进行DNA标记,通过酶联免疫杂交的方法检测。该试剂盒可以标记25次反应,每次标记的DNA量为10ug-20ug,并可做50张10×10cm膜的杂交和检测。 应用:非放射性DNA标记及检测试剂盒以检测0.1pg的同源DNA,能检测1ug哺乳动物DNA中的单拷贝基因。跟放射性标记系统比较,此试剂盒能快速得到实验结果,而且消除了放射性同位素的不安全问题。从DNA标记和杂交能见到检测结果,整个实验过程24小时内能完成。这试剂盒的灵敏度与特异性使它适用于所有的杂交技术以替代放射性同位素标记和放射自显影术。这个标记方法和检测系统适用于DNA—印迹转移、菌落杂交、噬斑杂交及原位杂交。 |
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原理:用DIG-dUTP为底物,随机掺入法进行DNA标记,通过酶联免疫杂交的方法检测。该试剂盒可以标记25次反应,每次标记的DNA量为10ug-20ug,并可做50张10×10cm膜的杂交和检测。 应用:非放射性DNA标记及检测试剂盒以检测0.1pg的同源DNA,能检测1ug哺乳动物DNA中的单拷贝基因。跟放射性标记系统比较,此试剂盒能快速得到实验结果,而且消除了放射性同位素的不安全问题。从DNA标记和杂交能见到检测结果,整个实验过程24小时内能完成。这试剂盒的灵敏度与特异性使它适用于所有的杂交技术以替代放射性同位素标记和放射自显影术。这个标记方法和检测系统适用于DNA—印迹转移、菌落杂交、噬斑杂交及原位杂交。 |
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原理:用DIG-dUTP为底物,随机掺入法进行DNA标记,通过酶联免疫杂交的方法检测。该试剂盒可以标记25次反应,每次标记的DNA量为10ug-20ug,并可做50张10×10cm膜的杂交和检测。 应用:非放射性DNA标记及检测试剂盒以检测0.1pg的同源DNA,能检测1ug哺乳动物DNA中的单拷贝基因。跟放射性标记系统比较,此试剂盒能快速得到实验结果,而且消除了放射性同位素的不安全问题。从DNA标记和杂交能见到检测结果,整个实验过程24小时内能完成。这试剂盒的灵敏度与特异性使它适用于所有的杂交技术以替代放射性同位素标记和放射自显影术。这个标记方法和检测系统适用于DNA—印迹转移、菌落杂交、噬斑杂交及原位杂交。 |
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原理:用DIG-dUTP为底物,随机掺入法进行DNA标记,通过酶联免疫杂交的方法检测。该试剂盒可以标记25次反应,每次标记的DNA量为10ug-20ug,并可做50张10×10cm膜的杂交和检测。 应用:非放射性DNA标记及检测试剂盒以检测0.1pg的同源DNA,能检测1ug哺乳动物DNA中的单拷贝基因。跟放射性标记系统比较,此试剂盒能快速得到实验结果,而且消除了放射性同位素的不安全问题。从DNA标记和杂交能见到检测结果,整个实验过程24小时内能完成。这试剂盒的灵敏度与特异性使它适用于所有的杂交技术以替代放射性同位素标记和放射自显影术。这个标记方法和检测系统适用于DNA—印迹转移、菌落杂交、噬斑杂交及原位杂交。 |
HLA(人类白细胞抗原)系统是目前所知人体zui复杂的多态系统。自1958年发现(Jean Dausset)*个HLA抗原,到20世纪70年代,HLA便成为免疫遗传学、免疫生物学和生物化学等学科的一个重要新兴研究领域。现在,已基本弄清其系统的组成、结构和功能,阐明了其理化性质和生物学作用。这些研究成果不仅具有重要的理论意义,而且具有巨大的生物医学价值。
1 HLA的本质及其结构
HLA是具有高度多态性的同种异体抗原,其化学本质为一类糖蛋白,由一条α重链(被糖基化的)和一条β轻链非共价结合而成。其肽链的氨基端向外(约占整个分子的3/4),羧基端穿入细胞质,中间疏水部分在胞膜中。HLA按其分布和功能分为Ⅰ类抗原和Ⅱ类抗原。
2 HLA的遗传控制
HLA受控于称作人类主要组织相容性复合体(MHC)的基因簇。MHC定位于第6染色体短臂上。
HALⅠ类抗原的特异性取决于α重链,由HLA-A、B、C位点编码;其β轻链是β2-微球蛋白,编码基因在第15染色体。HLAⅡ类抗原受控于HLA-D区(包含5个亚区),由其中的A基因和B基因分别为α重链和β轻链编码,抗原多态性取决于β轻链。以上各基因(名称为WHO命名委员会1975年修订)均系多态性位点(复等位),且共显性。如果把MHC作为一个整体来看待,其多态性则更为突出。保守地估计,至少存在1300个不同的单体型,相应地约有17×107个基因型。这就是除同卵双生子以外几乎无HLA相同者的遗传基础,从而HLA可视作个体的“身份证”。
3 HLA的生物学意义
HLA这一多态系统在其种系发展过程中被保存下来,具有特殊的生物学意义。
3.1 靶功能
HLAⅠ类抗原分布于所有有核细胞。其抗原特异性在于肽链抗原决定簇的特定氨基酸顺序。这些抗原可被外来物质例如某种病毒或化学物质加以改变,当这些基因产物被改变之后,便成为自身免疫原,成为免疫排除的耙子。可见,耙功能的实质在于“识别自我”,以保证机体的完整性。因此,分布于所有细胞及其多态性这一特点十分重要。
3.2 识别功能
HLA的识别功能实指在免疫反应中*的协同作用。抗体在B细胞生成,但在多数情况下,需要巨噬细胞和T淋巴细胞参与。其过程是:抗原经巨噬细胞处理后,抗原信息传递给T辅助细胞,后者再将信息传给B细胞,使B细胞进而分化生成专一抗体。在这个过程中,T辅助细胞不仅识别致敏巨噬细胞上的抗原,同时也要识别巨噬细胞是否与其本身的Ⅱ类抗原相一致。就是说,只有巨噬细胞的单体型和T辅助细胞的单体型相一致时,T辅助细胞才被激活,从而使免疫反应在严密的遗传控制下进行。
4 HLA的医学价值
4.1 HLA与器官移植
HLA的研究原初是在器官移植研究推动下开展起来的。故此,HLA又称移植抗原。临床实践表明,同种异体移植(除同卵双生子外)的排斥应是成功率的zui大障碍。在遗传学中,MHC是作为一个单位孟德尔式传递的。因此,同胞之间可有HLA相同、半相同和不同3种情况。实践证明,HLA相同的同胞供者的肾移植,90%以上效果良好;单体型不同的供者,效果明显下降;两单型皆不同者则很少存活。HLA本质和功能的揭示,为移植配型提供了重要的理论依据。可以说,器官移植是当代医学一项重要成就。
4.2 作为某些疾病的遗传标志
1972年Russel*个报告银屑病(牛皮癣)患者携带HLA-B13或HLA-B17。此后陆续发现大量其它疾病与特定的HLA相关,其中,HLA-B27抗原见于大约90%的强直性脊椎炎病人,以至使HLA分型具有了诊断价值,甚至,能较早地证实疾病亚型之间的临床区别,例如,寻常银屑病与HLA相关,而脓疱性银屑病则不然;青少年性胰岛素依赖型糖尿病与HLA-B8、HLA-Bw15和HLA-B18相关,而晚期发作型糖尿病并无这种相关。因此,特定类型的HLA便成为某些疾病的遗传标志。例如,常染色体隐性遗传的肾上腺皮质增生症是由于21-羟化酶缺乏。应用HLA抗原多态性作群体关联分析和家系连锁分析,发现有两个羟化酶位点(21-OHA和21-OHB)与HLA-B、DR紧密连锁。依此,可用HLA作出产前诊断。在优生学中,可以根据现有资料,对某些疾病推算出孩子患病的相对风险率。另一方面,关于HLA与长寿的关系,亦形成一个研究热点。
4.3HLA与法医
HLA因其高度多态性而成为zui能代表个体特异性并伴随个体终身的稳定的遗传标志,在无关个体之间HLA型别*相同的几率级低。法医学通过HLA基因型或表型检测进行个体识别以“验明正身”,同时因其单倍型遗传特征,也是亲子鉴定的重要手段。
HLA(体系结构,High Level Architecture)
在美国国防建模与仿真办公室(DMSO)1995年10月制定的建模与仿真主计划(MSMP)中,提出了未来建模/仿真的共同技术框架。它包括三个方 面:高层体系结构(HLA)、任务空间概念模型(CMMS)和数据标准(DS)。它们的共同目标是实现仿真间的互操作,并促进仿真资源的重用,具体地说, 就是通过计算机网络使得分散分布的各仿真部件能够在一个统一的仿真时间和仿真环境下协调运行,且可以重复使用。HLA的基本思想就是使用面向对象的方法, 设计、开发及实现系统不同层次和粒度的对象模型,来获得仿真部件和仿真系统高层次上的互操作性与可重用性。
[编辑本段]高层体系结构
1996年8月DMSO正式公布了HLA的定义和规范。经过改进完善,HLA的规则、接口规范、对象模型模板三项内容已在2000年9月22日由美国 IEEE标准化委员会正式定为IEEE1516, IEEE1516.1,IEEE1516.2 HLA标准。OMG,北约M&S组织也采纳HLA作为标准。
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