品牌 | 其他品牌 | 规格 | 50ml/100ml |
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供货周期 | 现货 | 主要用途 | 科研,化工 |
规格:50ml/100ml,价格:140/245元,产品简介
ECL化学发光试剂盒用于Western blot的化学发光检测,比DAB显色的灵敏度至少高50倍,可达ng水平。原理是采用新型发光底物(Luminol),可与二抗上耦连的辣根过氧化物酶发生化学反应,发出荧光,从而可以通过用X光片压片或其它适当荧光成像设备检测样品。在电泳的过程中,将复杂的蛋白混合物经SDS-PAGE分离,并转移到固相膜上(如PVDF、NC)等,经辣根过氧化物酶(HRP)标记的二抗与膜上的蛋白直接反应。当加入ECL化学发光试剂后,Luminol发生氧化降解,并发射波长为428nm的光,此光可经X光片(放射自显影片)感光记录下来。
试剂盒组份
存储温度
A液 (避光) 25 mL 50mL 4℃
B 液 25 mL 50mL 4℃
试剂盒以外自备仪器和试剂
镊子,1.5ml离心管,X光片,暗盒,显影液,定影液、去离子水
操作步骤
1、 按照常规的Western实验步骤进行操作到二抗孵育和洗涤后的膜待用。2、 ECL工作液的配制: 取1.5ml的eppendorf管,加入500μL A液和500μL B 液,混匀后即为ECL工作液(配制后请尽快使用)。3、 用平头镊将膜取出,用吸水纸略吸去过多的液体(切勿接触膜的蛋白面),然后置于一洁净保鲜膜上。4、 根据膜的大小,按每10平方厘米膜加1ml ECL工作液的比例,滴加ECL工作液到膜上,确保使工作液均匀覆盖在膜上,放置1-2分钟。 5、取膜,弃ECL工作液,用吸水纸略吸去过多的液体。将膜放在两片保鲜膜中间,小心赶尽气泡。 6、将膜固定于片夹内。暗室内压片1分钟,立即显影定影,根据结果再调整压片时间。或直接分别压片30秒,1,3,5分钟,然后一起显影定影观察结果。
保存条件
4℃避光保存,一年有效。
注意事项
1、 A液和B液在吸取过程中必须要更换枪头,A液和B液相互污染后会导致A液或B液逐渐失效,影响后续的使用效果。2、 各溶液使用后,请盖紧瓶盖,以防失效。特别是B液,含有氧化剂,比较容易被还原而失效。3、 A液和B液均对人体有害,操作时请注意适当防护。4、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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